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【摘要】 在EMAReal-Time PCR檢測方法的基礎(chǔ)上,組裝檢測乳制品中活雙歧桿菌的熒光定量PCR試劑盒。建立了EMAReal-Time PCR檢測乳制品中活雙歧桿菌的標(biāo)準(zhǔn)曲線。組裝出檢測乳制品中活雙歧桿菌的熒光定量PCR試劑盒。該試劑盒批內(nèi)及批間變異系數(shù)(CV)均小于5%;對(duì)乳制品中常見乳酸菌無交叉反應(yīng);zui低檢測限為2×104CFU/mL。該試劑盒在-20℃下,至少可保存6個(gè)月,4℃可保存3個(gè)月。分別采用研究所獲得的試劑盒和平板菌落計(jì)數(shù)法檢測12份市售酸乳中的活雙歧桿菌的數(shù)量,2種檢測方法計(jì)數(shù)結(jié)果差異不顯著(P>0.05)。該方法所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)大于98%。所研制的試劑盒重復(fù)性較好、特異性較強(qiáng)、靈敏度較高,可以準(zhǔn)確地定量檢測乳制品中的活雙歧桿菌。